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AAV在眼部注射方法有哪些

然而，基于AAV载体的基因治疗通常采用视网膜下腔注射，要求高技能操作，增加视网膜脱离风险，并受限于横向扩散能力，只能感染注射中心附近一小部分视网膜细胞。玻璃体腔注射避免了这些问题，是一种常用的安全、简便的递送方式。但缺乏高效且特异性转导视网膜细胞的AAV载体。

视网膜下腔注射适用于RPE细胞和光感受器细胞的转导，主要步骤包括麻醉、切口制作、插入注射针、开始注射、缓慢出针，以及避免切口处感染等。此方法可避免触发体液免疫反应，对另一只眼再次视网膜下注射无影响。在选择注射方式时，应考虑疾病的性质，同时选择对小鼠最便利的方式。

然而，基于AAV载体的眼病基因治疗通常需要视网膜下腔注射，这需要经验丰富的专家进行，增加视网膜脱离的风险。AAV横向扩散能力有限，只能感染注射中心附近的一部分视网膜细胞。玻璃体腔注射能避免这些问题，是一种常用、安全、操作简单的递送方式。

特别是AAV-VEC，研究人员成功实现了vWF基因的表达，这对于治疗血管性血友病等遗传性疾病提供了突破性的治疗手段。例如，WF缺陷型小鼠通过静脉注射，利用AAVsig的I-587位七聚体肽靶向内皮细胞，显著提高了转导效率。

实现特异性表达的方法包括选择组织特异性血清型、使用细胞特异性启动子以及局部注射等。通过优化AAV血清型、启动子选择与注射策略，可实现目标组织或细胞的精准基因传递与表达，为基因治疗与科研提供强大工具。针对特异性表达的策略不断优化，AAV的应用领域与潜力持续扩展。

圆窗膜（RWM）注射方法，适用于新生小鼠和非人灵长类动物，载体可传送至耳蜗鼓阶的外淋巴。此方法对内耳外毛细胞转导率相对有限。具体操作包括麻醉小鼠，消毒耳朵，切开皮肤露出鼓室大疱，然后在大疱上穿孔，使用移液管在RWM中心轻轻穿刺，注入0.6~2μL的AAV载体，封孔并缝合伤口。